小鼠精原干细胞体外培养诱导成骨的能力

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.23.016

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (23): 3702-3706.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.23.016

• 干细胞培养与分化 stem cell culture and differentiation • 上一篇下一篇

小鼠精原干细胞体外培养诱导成骨的能力

胡红梅¹，李伟²，孙新明¹，蒋芬¹，杨赣军¹

¹井冈山大学医学院组织胚胎学教研室，江西省吉安市 343000；²井冈山大学临床医学院口腔系，江西省吉安市 343000

修回日期:2014-04-04 出版日期:2014-06-04 发布日期:2014-06-04
通讯作者: 李伟，硕士，副教授，井冈山大学临床医学院口腔系，江西省吉安市 343000
作者简介:胡红梅，女，1976年生，江西省抚州市人，汉族，2007年泸州医学院毕业，硕士，讲师，主要从事精原干细胞的分化研究。
基金资助:
江西省吉安市2013年度科技计划项目([2013]18)，课题名称：小鼠精原干细胞体外培养及分化的研究

Osteogenetic ability of mouse spermatogonial stem cells cultured in vitro

Hu Hong-mei¹, Li Wei², Sun Xin-ming¹, Jiang Fen¹, Yang Gan-jun¹

¹Department of Histology and Embryology, School of Medicine, Jing Gang Shan University, Ji’an 343000, Jiangxi Province, China; ²Oral Department of Clinical Medical School, Jing Gang Shan University, Ji’an 343000, Jiangxi Province, China

Revised:2014-04-04 Online:2014-06-04 Published:2014-06-04
Contact: Li Wei, Master, Associate professor, Oral Department of Clinical Medical School, Jing Gang Shan University, Ji’an 343000, Jiangxi Province, China
About author:Hu Hong-mei, Master, Lecturer, Department of Histology and Embryology, School of Medicine, Jing Gang Shan University, Ji’an 343000, Jiangxi Province, China
Supported by:
the Science and Technology Plan of Ji’an City in 2013, No. [2013]18

摘要/Abstract

摘要：

背景：精原干细胞具有自我更新及多向分化潜能，并可将其体外定向诱导为特异性细胞，提示精原干细胞亦可能具有向成骨细胞转化的可能性，但有关这方面的研究尚未见报道。

目的：观察小鼠精原干细胞在体外成骨细胞培养条件下的生物学特征变化。

方法：取生后15-20 d小鼠胫骨骨髓，分离、培养骨髓基质细胞，5 d后丝裂霉素C处理制备成饲养层；取生后七至八天小鼠睾丸，经酶消化后制成单细胞悬液并接种于饲养层上。3 d后实验组和对照组分别用条件培养液和基本培养液进行诱导培养，通过倒置相差显微镜观察培养细胞生长状况及形态变化，并结合碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色等方法进行结果检测。

结果与结论：实验组精原干细胞在条件培养液中较对照组细胞贴壁生长快，条件培养3-6 d后见细胞生长迅速，呈集落样增长，细胞立体感增强，细胞团、簇的大小继续增加，细胞外基质增多，但未见明显细胞间桥。培养15 d后，对两组细胞进行碱性磷酸酶染色可见胞质、胞膜染为黑色，呈阳性。在荧光显微镜下可见实验组细胞浆内出现绿色荧光，呈阳性荧光反应；对照组细胞呈阴性反应，说明实验组细胞Ⅰ型胶原染色阳性，这与成骨细胞的生物学特性相似。提示精原干细胞在一定的诱导条件下具有成骨能力，有望为骨组织工程学研究提供种子细胞。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

全文链接：

关键词: 干细胞, 培养, 精原干细胞, 成骨能力, 诱导, 生物学特性, 种子细胞

Abstract:

BACKGROUND: Spermatogonial stem cells are a kind of adult stem cells, which have self-renewal and differentiation potential, and can be differentiated into specific cells in vitro, suggesting that the spermatogonial stem cells may be possibly differentiated into osteoblasts. But the related research has not been reported.

OBJECTIVE: To observe the biological characterization and osteogenic process of mouse spermatogonial stem cells cultured in vitro.

METHODS: Spermatogonial stem cells were obtained from the testicle of mice aged 15-20 days, and were cultured on the feeder layer from bone marrow stroma cells in vitro. When cultured for 3 days, the cells were cultured in the conditioned medium (experimental group) and basic medium (control group). The cells proliferation capability and osteogenic property were examined by phase-contrast microscope, alkaline phosphatase activity and type I collagen immunofluorescence staining.

RESULTS AND CONCLUSION: Spermatogonial stem cells proliferated faster in the experiment group than in the control group. Cells grew rapidly in colony-like shape in the conditioned medium at 3-6 days, the three-dimensional feeling enhanced, cell mass and clusters continued to increase in size, the extracellular matrix was increased in number and the cytoplasmic bridge was not obvious. After culture for 15 days, cells in the two groups were positive for alkaline phosphatase staining that the cytoplasmic membrane was dyed black. Under the fluorescent microscope, green fluorescence was visible in the experimental group, suggesting the cells in the experimental group was positive for type I collagen, but negative in the control group, which is similar with the biological characteristics of osteoblasts. These findings indicate that spermatogonial stem cells possess the osteogenic capability under induction conditions, which are expected to provide seed cells for bone tissue engineering.

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Key words: stem cells, osteoblasts, microscopy, fluorescence, culture media, conditioned

中图分类号:

R394.2

胡红梅，李伟，孙新明，蒋芬，杨赣军. 小鼠精原干细胞体外培养诱导成骨的能力[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(23): 3702-3706.

Hu Hong-mei, Li Wei, Sun Xin-ming, Jiang Fen, Yang Gan-jun. Osteogenetic ability of mouse spermatogonial stem cells cultured in vitro[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(23): 3702-3706.

图/表（结果） 1

参考文献

[1] Thomson JA,Itskovitz- Eldor J,Shapiro SS,et al.Embryonic stem cell lines deribed from human blastocyts.Science. 1998;282(5391):1145-1147.
[2] Sumner JP, Shapiro EM, Maric D,et al.In vivo labeling of adult neural progenitors for MRI with micron sized particles of iron oxide: quantification of labeled cell phenotype.Neuroimage. 2009;44(3):671-678.
[3] Vande Velde G, Raman Rangarajan J, Vreys R, et al. Quantitative evaluation of MRI-based tracking of ferritin-labeled endogenous neur cell progeny in rodent brain.Neuroimage. 2012; 62(1):367-380.
[4] Boulland JL, Leung DS, Thuen M,et al.Evaluation of intracellular labeling with micron-sized particles of iron oxide (MPIOs) as a general tool for in vitro and in vivo tracking of human stem and progenitor cells.Cell Transplant. 2012; 21(8):1743-1759.
[5] Chikhovskaya JV, Jonker MJ, Meissner A, et al.Human testis-derived embryonic stem cell-like cells are not pluripotent, but possess potential of mesenchymal progenitors. Hum Reprod. 2012;27(1):210-221.
[6] Moraveji SF, Attari F, Shahverdi A,et al.Inhibition of glycogen synthase kinase-3 promotes efficient derivation of pluripotent stem cells from neonatal mouse testis. Hum Reprod. 2012; 27(8):2312-2324.
[7] Kanda A, Sotomaru Y, Shiozawa S,et al.Establishment of ES cells from inbred strain mice by dual inhibition (2i).J Reprod Dev. 2012;58(1):77-83.
[8] 胡智兴,耿菊敏,梁道明.肝细胞生长因子促进人胚胎干细胞向神经前体细胞分化[J].中国病理生理杂志,2010,26(4): 730-736.
[9] 李英博,王莎莉.体外诱导人胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展[J].神经解剖学杂志,2004,20(6):633-636.
[10] 田寿福,郭烨,牛鑫,等.细胞生长因子联合诱导ES细胞向肾脏前体细胞分化的实验研究[J].中国中西医结合肾病杂志,2012, 13(12):1058-1061.
[11] 马良宏,丁强,冯立新.精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(31):5767-5772.
[12] De Beur SM, Finnegan RB, Vassiliadis J,et al.Tumors associated with oncogenic osteomalacia express genes important in bone and mineral metabolism.J Bone Miner Res. 2002;17(6):1102-1110.
[13] Imanishi Y, Hashimoto J, Ando W,et al. Matrix extracellular phosphoglycoprotein is expressed in causative tumors of oncogenic osteomalacia.J Bone Miner Metab. 2012;30(1): 93-99.
[14] 杨春露,赵勇,陈建庭.骨髓基质细胞-成骨细胞复合培养体系的建立[J].中国组织工程研究,2013,17(6):980-984.
[15] Bing Z, Linlin L, Jianguo Y, et al. Effect of mechanical stretch on the expressions of elastin, LOX and Fibulin-5 in rat BMSCs with ligament fibroblasts co-culture. Mol Biol Rep. 2012;39(5): 6077-6085.
[16] Qing C,Wei-ding C,Wei-min F.Co-culture of chondrocytes and bone marrow mesenchymal stem cells in vitro enhances the expression of cartilaginous extracellular matrix components.Braz J Med Biol Res. 2011;44(4):303-310.
[17] Bellaiche J,Lareyre JJ,Cauty C,et al.Spermatogonial Stem Cell Quest: nanos2, Marker of a Subpopulation of Undifferentiated A Spermatogonia in Trout Testis. Biol Reprod. 2014.[Epub ahead of print]
[18] Eslahi N, Hadjighassem MR.The effects of poly L-lactic acid nanofiber scaffold on mouse spermatogonial stem cell culture.Int J Nanomedicine. 2013;8:4563-4576.
[19] Rastegar T, Minaee MB, Habibi Roudkenar M,et al.Improvement of Expression of α6 and β1 Integrins by the Co-culture of Adult Mouse Spermatogonial Stem Cells with SIM Mouse Embryonic Fibroblast Cells (STO) and Growth Factors.Iran J Basic Med Sci. 2013;16(2):134-139.
[20] Gassei K,Orwig KE.SALL4 expression in gonocytes and spermatogonial clones of postnatal mouse testes. PLoS One. 2013;8(1):e53976.
[21] Hermann BP, Sukhwani M, Simorangkir DR,et al.Molecular dissection of the male germ cell lineage identifies putative spermatogonial stem cells in rhesus macaques. Hum Reprod. 2009;24(7):1704-1716.
[22] Lee YA, Kim YH, Ha SJ, et al.Effect of sugar molecules on the cryopreservation of mouse spermatogonial stem cells.Fertil Steril. 2014;101(4):1165-1175.
[23] Tiptanavattana N, Thongkittidilok C,Techakumphu M,et al.Characterization and in vitro culture of putative spermatogonial stem cells derived from feline testicular tissue.J Reprod Dev. 2013;59(2):189-195.
[24] Yang QE,Oatley JM.Spermatogonial stem cell functions in physiological and pathological conditions.Curr Top Dev Biol. 2014;107:235-267.
[25] 徐富翠,吴绍华,郭勇,等.精原干细胞体外非分化扩增的初步研究[J].四川大学学报医学版,2006,37(4):625-628.
[26] Chaudhary LR, Hofmeister AM, Hruska KA, et al. Differential growth factor control of bone formation through osteoprogenitor differentiation. Bone. 2004;34(3):402-411.
[27] Tiptanavattana N,Thongkittidilok C,Techakumphu M,et al.Characterization and in vitro culture of putative spermatogonial stem cells derived from feline testicular tissue.J Reprod Dev. 2013;59(2):189-195.
[28] 张光东,徐艳,吴友农,等.碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响[J].口腔医学,2006,26(4):261-263.
[29] 邬波,马旭,朱大木,等.胰岛素样生长因子1对骨髓间充质干细胞软骨分化及基质金属蛋白酶表达的影响[J].中国组织工程研究, 2013,17(19):3421-3429.
[30] 包敏,张德平.胰岛素样生长因子1作用下的骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制[J].中国呼吸与危重监护杂志, 2011,10(1):42-49.

引言

干细胞是体内具有多向分化潜能、自我更新能力和分裂增殖能力的细胞，是研究发育生物学机制的理想模型，同时也是临床上创伤修复、组织或器官功能重建、基因治疗等的理想的细胞移植物, 因此干细胞的研究及利用干细胞治疗疾病的细胞组织工程，成为继人类基因大规模测试完成后生命科学中最活跃的研究领域之一。

精原干细胞作为干细胞家族成员之一，不仅具有干细胞最根本的特征，同时有正常的二倍体核型，可以冷冻保存、体外培养、基因操作等特征，对医学、生物学等领域研究具有潜在的应用价值；其次，精原干细胞还是体内惟一的一种可以从细胞水平上来认识其增殖、分化及这些活动调节的干细胞，加之在青春期以前精原干细胞在睾丸中的数目较多、易于获得、取材方便等优点，成为近年来研究成体干细胞生物学特性及生物学技术应用研究的理想模型^[1]。

精原干细胞是一种成体干细胞，具有自我更新及多向分化潜能，并具有一定的可塑性，能“转分化”为与它原存部位不同的其他特化组织细胞^[2-4]。已有研究表明，精原干细胞具有向造血细胞、多巴胺能神经元、肌细胞、血管内皮细胞、神经胶质细胞、心肌细胞等分化的能力^[5-7]，将其体外扩增，可为细胞移植提供足够的来源，将其体外定向诱导为特异性细胞，再植入受者体内，可达到修复损伤、治疗疾病的目的^[8-11]。

牙周病是牙周组织的慢性进行性破坏性疾病，牙周膜、牙槽骨和牙骨质都受到损害时，最终因支持组织破坏，尤其是牙槽骨丧失而导致牙齿脱落，严重影响人们的生活质量，如何促进牙槽骨的新生，重建牙周组织生理连接是当今牙周炎的研究热点^[12-13]。由于精原干细胞的易于获得、取材方便以及可以多向分化的特点，提示精原干细胞亦可能具有向成骨细胞转化的可能性，利用精原干细胞分化为成骨细胞的潜能，并运用到牙槽骨吸收导致的牙周疾病治疗中，将是一个极具探索性的研究，目前有关这方面的研究尚未见报道。

文章尝试在体外分离、培养、纯化精原干细胞，并观察其在成骨细胞培养条件下的生物学特征变化，为治疗牙槽骨吸收而研制骨组织工程材料的种子细胞选择奠定实验基础。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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材料方法

设计：细胞学水平，观察性实验。

时间及地点：于2013年4月在井冈山大学医学院中心实验室完成。

材料：

实验动物：取15-20 d的小鼠2只，雌雄不拘；出生七至八天雄性小鼠1只，均为清洁级BABL/c，购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，井冈山大学实验动物中心机构许可证号：SYXK(赣)2012-0001。实验过程中对动物的处置符合2009年《Ethical issues in animal experimentation》相关动物伦理学标准的条例。

实验方法：

骨髓基质细胞分离、培养及饲养层的制备：取出生15-20 d小鼠2只，颈椎脱臼处死后，无菌条件下取其双侧股骨和胫骨。用1 mL含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液冲洗骨髓，离心去上清，然后加入适量的IMEM(含体积分数10%胎牛血清)，置37 ℃、5%CO₂培养箱中培养。4 h后换液，以去除未贴壁的血细胞，以后每隔3 d换液1次。在倒置显微镜下观察细胞形态和生长情况，当细胞分裂增殖达瓶壁面积的80%时，用丝裂霉素C处理制成饲养层^[14-16]。

精原干细胞的分离、培养：取出生七至八天雄性小鼠，颈椎脱臼处死后，取其双侧睾丸，去其表面白膜、血管及附睾，加入适量D-Hank’s液，用吸管吹打将生精小管吹散。再加入10倍体积的0.1% Ⅳ型胶原酶，于37 ℃、体积分数5%CO₂条件下作用10 min，移入10 mL离心管，静置待生精小管沉降后，弃上清。重复上述操作1次后，加入0.25%胰蛋白酶，在显微镜下控制消化时间，见消化成单细胞或小细胞团时，用含体积分数10%胎牛血清的IMDM培养基终止消化，离心，去上清，重新加入2 mL上述培养基，吹打数次，制成单细胞悬液接种于上述饲养层中^[17-19]。

精原干细胞生长状况的观察：在倒置相差显微镜下观察精原干细胞生长部位与基质细胞的关系，并观察增殖干细胞的形态大小，细胞核大小，克隆形成时间，细胞增殖状况，增殖时间，细胞的结构。

精原干细胞的C-KIT受体鉴定(ABC法)：选取培养20 d的生长有精原干细胞的载玻片，甲醇∶冰醋酸(3∶1)固定液固定30 min，滴加含体积分数3%H₂O₂的PBS中20-30 min，以阻断内源性的过氧化物酶，滴加1∶200稀释的一抗(兔抗鼠C-kit)，对照组滴加生理盐水，湿盒内37 ℃保湿1 h，滴加生物素标记的二抗(羊抗兔IgG )，置于37 ℃湿盒内30 min，SABC工作液，DAB显色，干燥后甘油明胶封固^[20-21]。

精原干细胞的传代纯化及诱导培养：精原细胞培养3 d后，用0.125%胰蛋白酶+0.01%乙二胺四乙酸消化2 min，待圆形的精原细胞脱离后，Hank’s液终止消化，将传代纯化的精原干细胞悬液吸出，离心弃上清，取6孔板，孔内放置事先制备好的盖玻片，将精原细胞接种在该盖玻片上，分组进行培养诱导分化。对照组：用基本培养液(DMEM+100 U/mL青霉素+100 U/mL链霉素+体积分数10%胎牛血清培养精原细胞，四至五天换液1次，共培养15 d。实验组：基本培养液中添加50 mmol/L β-甘油磷酸钠、10^-⁶ mol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、50 nmol/L胰岛素、20 nmol/L碱性成纤维细胞生长因子，称为条件培养液，用条件培养液诱导培养精原干细胞，四至五天换液1次，共培养15 d。

钙-钴法碱性磷酸酶染色：培养2周后，取出2组细胞爬片，用PBS漂洗后，以40 g/L的多聚甲醛固定30 min，钙-钴法碱性磷酸酶染色^[22]。

Ⅰ型胶原免疫荧光检测：培养2周后，对2组细胞进行Ⅰ型胶原检测。采用间接免疫荧光法测定，取出细胞爬片，用PBS漂洗后，以40 g/L的多聚甲醛固定30 min，常规处理后滴加山羊血清封闭液，加一抗Ⅰ型胶原抗体，4 ℃冰箱过夜，再加二抗生物素化羊抗兔IgG，于37 ℃湿盒中保存30 min后，滴加素生物素过氧化物酶复合物-荧光素异硫氰酸盐于37 ℃湿盒中保存30 min，90%甘油封固，荧光显微镜下观察。

主要观察指标：两组精原干细胞在不同时间段培养时的形态学观察，钙-钴法碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫荧光检测^[23]。

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讨论

精原干细胞属于不均一的细胞体系，包括多种类型。在实验中发现，动物日龄的选择、适当的组织消化步骤及合理的饲养层的选择，是获得高产量高纯度有活力的精原干细胞的重要影响因素^[24]。本实验选用七至八天雄性小鼠，是因为此时期的小鼠生精上皮内基本只有A型精原细胞和支持细胞，其他各级生精细胞尚未发育成熟，理论上可获得最大量的精原干细胞。作者采用两步酶消化法结合差速贴壁法，能制备出大量纯度较高的精原干细胞。在干细胞研究应用中，首先要解决的关键性问题就是干细胞在体外的非分化扩增，即如何在保持干细胞数目扩增的同时又抑制其分化。目前主要有两种方法：一是用饲养层细胞来支持干细胞的培养，二是用条件培养基。饲养层的主要作用是提供干细胞培养时的附着支持物，分泌干细胞体外存活和增殖必须的生长因子，还兼有同化营养液,除去培养环境中代谢毒素的作用。以骨髓基质细胞作为饲养层培养精原干细胞，在未加任何外源性因子的条件下可观察到精原干细胞呈现大量未分化增殖现象，和传统的饲养层相比，其具有简单、经济、可操作性强等优点。前期的研究已报道了用原代骨髓基质细胞作饲养层来培养精原干细胞的可能机制并做了相关鉴定^[25]。

本实验选用条件培养基即在基础培养液中添加了一定诱导物质以观察精原干细胞的生物学特征的变化，结果显示，细胞贴壁及增殖速度快于对照组，但增殖的细胞之间不表现出精原干细胞的特征性结构－胞质间桥，这提示细胞形态结构发生了一定的变化；其次免疫荧光阳性显示出实验组细胞内Ⅰ型胶原的表达，这进一步提示细胞在功能上具有向成骨细胞转化的可能性，现对其可能的机制作如下讨论：

维生素C是胶原中脯氨酸和赖氨酸末端羟基化的共同影响因子，是细胞合成ⅠChaudhary等^[26-27]将其作为阳性对照来研究其他生长因子或激素等对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响；其次，地塞米松还具有促进胰岛素样生长因子和Ⅰ型胶原合成的作用，目前是广泛用于骨髓基质干细胞、牙髓细胞、牙囊细胞等向成骨样细胞分化的诱导剂。碱性成纤维细胞生长因子是一种广谱的有丝分裂源，对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促增殖作用，能够促进软骨及骨组织的形成。本实验用碱性成纤维细胞生长因子并联合应用了高浓度(10^-⁶ mol/L)地塞米松，发现它们在促进细胞增殖的同时，还能促进细胞的分化。型胶原所必需的成分，它可诱导成骨细胞表达特异性分化蛋白基因，从而促使细胞碱性磷酸酶活性的增加和蛋白质合成，同时刺激钙盐的沉积，促进钙化结节的形成。地塞米松是人工合成的糖皮质激素，骨细胞是糖皮质激素的靶细胞，故地塞米松可有效地调节骨细胞的生长和分化，

胰岛素通过促进成骨细胞增殖和Ⅰ型胶原的合成发挥作用，研究显示，胰岛素可促进人牙髓细胞分化成具有矿化能力的细胞，联合应用碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素促进作用更明显^[28-30]。β-甘油磷酸钠能为细胞提供磷酸根，磷酸根作为碱性磷酸酶作用底物，能加速生理性钙盐沉积；同时磷是机体的一种重要元素，参与骨质的形成及细胞膜的组成，并与许多代谢中的酶活性有关，从而促进向成骨细胞分化的转变。碱性磷酸酶是成熟成骨细胞的标志性酶之一，是参与骨形成、代谢及再生的重要物质。它能够水解有机磷酸酶，使局部PO₄⁺浓度增高，并可破坏钙化抑制剂，从而启动钙化，因此碱性磷酸酶在体外钙化中起着关键性作用。Ⅰ型胶原蛋白是成骨细胞分泌的一种蛋白，是骨胶原的重要组成部分，经矿化后为骨骼提供支架。这些说明精原干细胞在成骨细胞培养条件下物学特征发生了变化，可诱导分化为具有某些成骨细胞特征的细胞。

本实验初步探讨了精原干细胞在成骨细胞培养条件的生物学特征变化，结果提示了精原干细胞在该诱导培养条件下具有成骨能力的趋势，这将为进一步研究成体干细胞的多向分化理论提供实验参考，同时也为深入研究精原干细胞向其他细胞转化提供实验基础。

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[1]	林清凡, 解一新, 陈婉清, 叶振忠, 陈幼芳. 人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 4970-4975.
[2]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[3]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[4]	顾霞, 赵敏, 王平义, 李一梅, 李文华. 低氧诱导因子1α与低氧相关疾病信号通路的关系[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1284-1289.
[5]	刘聪, 刘肃. miR-17-5p调控低氧诱导因子1α介导脂肪细胞分化及血管生成的分子机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1069-1074.
[6]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[7]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[8]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[9]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[10]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[11]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[12]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[13]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[14]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[15]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.